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細(xì)胞培養(yǎng)分類及區(qū)別

原代培養(yǎng) 通過組織塊直接長出單層細(xì)胞或用酶或機(jī)械方法將組織分散成單個細(xì)胞開始培養(yǎng),在**傳代前的培養(yǎng)可認(rèn)為是原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)**大的優(yōu)點(diǎn)是,組織和細(xì)胞剛剛 離體,生物性狀尚未發(fā)生很大變化,在一定程度上能反映體內(nèi)狀態(tài)。特別是在細(xì)胞培養(yǎng)會合時,原代培養(yǎng)的某些特殊功能表達(dá)尤為強(qiáng)烈。在這樣的培養(yǎng)階段能更好地 顯示與親體組織緊密結(jié)合的形態(tài)學(xué)特征。在供體來源充分、生物學(xué)條件穩(wěn)定的情況下,采用原代培養(yǎng)做各種實(shí)驗,如藥物測試、細(xì)胞分化等,效果很好。但應(yīng)注意, 原代培養(yǎng)組織是由多種細(xì)胞成分組成的,比較復(fù)雜。即使全為同一類型的細(xì)胞,如上皮細(xì)胞或成纖維細(xì)胞,也仍具有異質(zhì)性,在分析細(xì)胞生物學(xué)特性時比較困難。其 次,由于供體的個體差異及其他一些原因,細(xì)胞群生長效果有時也不一致。 

原代培養(yǎng)也是建立各種細(xì)胞系(株)必經(jīng)的階段。假如原代培養(yǎng)能夠維持幾小時甚**更長,即可進(jìn)行進(jìn)一步篩選。有的細(xì)胞具有繼續(xù)增殖能力,有的細(xì)胞類 型只是存活而不增殖,而另外一些細(xì)胞只是在特殊條件下應(yīng)用而不存活,因而細(xì)胞類型的分布將會改變。在單層培養(yǎng)的情況下,瓶底全部鋪滿細(xì)胞,達(dá)到會合以后, 對密度有依賴性的細(xì)胞則逐漸減少生長,而失去密度依賴敏感性的細(xì)胞則生長增加,天然或自發(fā)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞則過度生長。借助于頻繁傳代,保持細(xì)胞低密度生長,有 利于保存細(xì)胞的正常表型(如小鼠成纖維細(xì)胞)。而自發(fā)轉(zhuǎn)化則傾向于高細(xì)胞密度的過度生長。 

傳代培養(yǎng) 原代培養(yǎng)形成的單層細(xì)胞匯合以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會因生成空間不足或由于細(xì)胞密度過大引起營養(yǎng)枯竭,都將影響細(xì)胞的生長,這一程序常稱為傳代 或傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)在**傳代時即為細(xì)胞系,能連續(xù)培養(yǎng)下去的為連續(xù)細(xì)胞系;不能連續(xù)培養(yǎng)的為有限細(xì)胞系。通常,傳代培養(yǎng)是指擴(kuò)大培養(yǎng),也就是將一份細(xì) 胞一分為二或者一分為三進(jìn)行培養(yǎng)等。但嚴(yán)格說來,不論稀釋與否,將細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移或移植到另一個培養(yǎng)瓶即稱為傳代或傳代培養(yǎng)。可以理解,在任何時 候,細(xì)胞從一個瓶子接種到另一個瓶子時總會丟失一部分,因此,在客觀上細(xì)胞必定有所稀釋。 

傳代代數(shù)這一概念常常容易同“增殖代數(shù)”相混淆。細(xì)胞“一代”一詞僅指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)時的一段時間。如某一細(xì)胞系為第153代,即指該細(xì) 胞系已傳代153次。它與細(xì)胞“增殖代數(shù)”(細(xì)胞世代或倍增)不同,在細(xì)胞一代中,細(xì)胞約能倍增3~6次。由此可見,細(xì)胞代數(shù)與增殖代數(shù)相關(guān),確切的代數(shù) 則依賴于細(xì)胞株和培養(yǎng)條件的不同而異。但構(gòu)成一個細(xì)胞系的生長條件必須是同樣的,因而細(xì)胞系應(yīng)該表達(dá)近似的增殖代數(shù)或倍增代數(shù)。 


原代培養(yǎng)物經(jīng)**傳代成功后即為細(xì)胞系(cell line), 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。 

從一個經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系由單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群稱細(xì)胞株(cell strain)。所以細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,可培養(yǎng)到40-50代。
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