欧美精品影院-欧美久久天天综合香蕉伊-欧美老汉色-欧美另类69xxxxxhd-色噜噜久久-色噜噜噜

Transwell細胞培養設計

實驗一:探究共培養條件分泌組是否有變化即細胞A和細胞B在共培養條件下其各自分泌組是否受到影響(暫且不討論誰對誰的影響)。
設計實驗:
1.使用Transwell培養技術,上層培養細胞A(細胞數設置為1*10^5個 <舉例>)下層培養細胞B(細胞數設置為2*10^5個 <舉例>)共培養h小時,從培養液中提取分泌蛋白(記為蛋白ⅰ)。

Transwell  1
2.相同培養條件 (培養基含量,細胞數,培養時間,溫度等)設置兩個Transwell:⑴上層培養細胞A(細胞數設置為1*10^5個 <舉例>)下層不放置細胞,⑵上層不放置細胞,下層培養細胞B(細胞數設置為2*10^5個 <舉例>),培養h小時,從培養液中提取分泌蛋白(記為蛋白ⅱ)。

Transwell 2-⑴                Transwell 2-⑵
3.質譜分析蛋白ⅰ和蛋白ⅱ的差別,初步分析共培養條件下分泌組是否影響。
4.置換細胞A ,細胞B培養的上下層條件,相同方法培養細胞,打質譜分析蛋白,分析結果是否與實驗一有差別,進一步分析原因。

總結:該方法盡可能的同一了共培養和單獨培養的差異,即排除了其他影響條件,只對比在共培養和單獨培養條件下分泌組的變化 ,從而為得到可信數據提供了條件,對照分析了在共培養條件下與單獨培養條件下分泌組的變化情況。缺點:由于細胞均未標記,即便結果顯示共培養和單獨培養分泌組確實有變化,仍無法得出兩種細胞誰影響誰,由此,可利用標記培養基的方法,繼續優化實驗。
實驗二:優化設計,將單獨培養的細胞A培養基用Leud-d3 標記,細胞B用Lys-C13 標記,而對共同培養的Transwell不做任何標記。如圖所示:
 
Transwell 1
 
Transwell 2-⑴                  Transwell 2-⑵
同實驗一,經過相同條件的培養,提取分泌組,質譜分析(另做A  B細胞上下層交換的實驗),對比單獨培養并分別標記與共培養但不標記條件下分泌組的變化,從而得到兩種細胞在共培養條件下是否影響彼此分泌組的變化,并且可以得出是誰影響誰,還是兩種細胞都有影響。 
主站蜘蛛池模板: 国产毛片久久国产 | 天天干天天爽天天操 | 最好看的中文字幕2019免费 | 日韩在线观看视频网站 | 国产农村一二三区 | 成年黄网站 | 操美女在线看 | 国产精品麻豆一区二区三区v视界 | 91最新地址 | 国产成人精品免费大全 | 亚洲国产一成人久久精品 | 国产区精品高清在线观看 | 天天舔天天干天天操 | 国产成人18黄禁网站免费观看 | 91精品成人免费国产 | 无遮挡h纯内动漫在线观看 无遮挡1000部拍拍拍免费观看 | 九九热视频在线免费观看 | 国产精品麻豆免费版 | 亚洲人精品 | 欧美成在人线a免费 | 国产成人精品亚洲 | 国产麻豆剧看黄在线观看 | 最近新中文字幕大全高清 | 波多野结衣手机视频一区 | 日韩欧美在线观看一区 | 亚洲天堂在线观看视频 | 国产大片免费在线观看 | 欧美中日韩在线 | 丝袜无内写真福利视频 | 久久久久久久九九九九 | 久久狠狠干 | 一级毛片在线完整免费观看 | 有哪些免费的毛片可以看 | 日韩短视频| 爆操在线| 欧美69色 | 亚洲成在人色婷婷 | 免费在线观看成年人视频 | 天天干天天玩 | 亚洲无线码一区二区三区在线观看 | 免费无遮挡啪啪羞羞漫画 |